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小鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞的鑒定方法

更新時(shí)間:2020-06-18點(diǎn)擊次數(shù):2105
  小鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。
  成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。
  小鼠骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)。
  小鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞的方法及其鑒定和生物學(xué)特性。方法:密度梯度離心法分離獲取小鼠骨髓單核細(xì)胞,培養(yǎng)于培養(yǎng)液中,每天于倒置顯微鏡下觀察EPC的形態(tài)。應(yīng)用細(xì)胞免疫熒光法、流式細(xì)胞技術(shù)鑒定EPC表面抗原標(biāo)志CD34、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體,熒光顯微鏡檢測(cè)EPC吞噬DiI標(biāo)記的乙?;兔芏戎鞍准敖Y(jié)合FITC標(biāo)記的荊豆凝集素功能。
  注意事項(xiàng)
  1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
  2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
  3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
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